Montagem do Nuleossomo
O DNA Eucariótico forma um complexo com proteínas histonas na estrutura do nucleossomo que contribui para estabilidade e compactação do DNA.
A montagem e desmontagem dos Nucleossomos do DNA recém-sintetizados ocorre na replicação. Portanto a estrutura do nucleossomo é desmontada toda vez que o DNA bifilamentar se deselecoidiza. Mas logo após a replicação do DNA sua estrutura é montada novamente.
Antes da replicação: Uma molécula de DNA associada a proteína histona
Após a replicação e montagem do cromossomo: Duas moléculas de DNA associadas a proteína histona.
O que acontece com as histonas durante a replicação do DNA eucariótico? Mais uma vez os experimentos de Meselson e Stahl foram utilizados para responder a essas perguntas:
Experimento:
1-) Cultivam células por várias gerações em um meio contendo aminoácidos marcados por isótopos pesado.- Proteínas histonas incorporaram esses aminoácidos e ficaram densas (aminoácidos pesados).
2-) Mudaram as células para um meio contento aminoácidos marcados por isótopos leves. – Proteínas histonas incorporaram esses aminoácidos e ficaram menos densas (aminoácidos pesado).
3-) Isolaram os octâmeros de histonas, e submetê-los a uma centrifugação de gradientes de densidade.
4-) juntaram os octâmeros com uma mistura de histonas antigas e novas (aminoácidos pesados e leves) para se replicarem.
5-) Isolaram novamente os octâmeros de histonas, e submetê-los a uma centrifugação de gradientes de densidade.
6-) Os octâmeros recém-sintetizados (aminoácidos pesados e leves) são menos densos e ficaram no meio do tubo (no alto)
7-) Os octâmeros antigos (aminoácidos pesados) são densos e ficaram no fundo do tubo.
Resultado: Após a replicação do DNA, os novos octâmeros são uma mistura aleatória de histonas antigas e novas.